使用奧林巴斯 CX33 生物顯微鏡觀察羊毛羊絨纖維鱗片,需從樣品制備、顯微鏡調(diào)試到觀察記錄分步操作,以下是詳細(xì)流程:
一、奧林巴斯CX33生物顯微鏡樣品準(zhǔn)備
取樣與預(yù)處理
從羊毛 / 羊絨制品中選取代表性纖維,避免拉扯導(dǎo)致鱗片損傷。若纖維粘連,可先用少量無水乙醇或蒸餾水輕輕梳理,去除表面灰塵和雜質(zhì)。
對于染色纖維,需確認(rèn)染料是否影響鱗片結(jié)構(gòu),必要時用中性洗滌劑溫和清洗后晾干。
制片步驟
干壓片法:將單根纖維平直放置在載玻片中央,滴 1 滴蒸餾水或甘油(甘油可增加透光性,減少氣泡),用鑷子輕輕蓋上蓋玻片,避免產(chǎn)生氣泡或纖維折疊。
切片法(可選):若纖維較粗,可使用切片機(jī)將纖維橫向或縱向切成薄片(厚度約 5-10μm),再按上述方法制片。
二、奧林巴斯CX33生物顯微鏡調(diào)試
放置與開機(jī)
將 CX33 顯微鏡放置在平穩(wěn)臺面上,遠(yuǎn)離光源直射和震動源。接通電源,打開光源開關(guān),調(diào)節(jié)亮度旋鈕至中等亮度(初始建議 50% 亮度,后續(xù)根據(jù)觀察調(diào)整)。
光學(xué)系統(tǒng)調(diào)節(jié)
目鏡選擇:默認(rèn)使用 10× 目鏡(若有不同倍率可選,先以 10× 開始),調(diào)節(jié)目鏡間距至與觀察者瞳孔間距匹配(雙眼圖像重合)。
聚光器與光闌:生物顯微鏡需調(diào)節(jié)聚光器高度和孔徑光闌:
觀察羊毛鱗片時,建議將聚光器升至中高位,孔徑光闌調(diào)至約 1/2-2/3 開度,以平衡亮度和對比度(光過強(qiáng)會導(dǎo)致鱗片反光,過弱則細(xì)節(jié)模糊)。
三、奧林巴斯CX33生物顯微鏡觀察操作
低倍鏡初檢(4×/10× 物鏡)
放置樣品:將載玻片放在載物臺上,用壓片夾固定,通過移動載物臺旋鈕將樣品移至視野中央。
粗調(diào)焦:轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,從側(cè)面觀察物鏡下降至接近蓋玻片(距離約 0.5cm),再緩慢上升鏡筒,直至視野中出現(xiàn)模糊的纖維輪廓。
細(xì)調(diào)焦與定位:切換至細(xì)準(zhǔn)焦螺旋微調(diào),直至纖維清晰可見。在低倍鏡下觀察纖維整體形態(tài),找到鱗片分布均勻的區(qū)域(如纖維中段,避免毛根或毛梢損傷處)。
高倍鏡觀察(40× 物鏡)
切換物鏡:緩慢轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,切換至 40× 物鏡(切勿觸碰鏡頭),此時需從側(cè)面確認(rèn)物鏡與蓋玻片距離(約 0.2cm),避免碰撞。
精細(xì)調(diào)焦與調(diào)光:僅使用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋微調(diào)焦距,同時微調(diào)光源亮度和孔徑光闌,突出鱗片的立體感和邊緣結(jié)構(gòu)。
鱗片特征觀察:
羊毛鱗片:多呈瓦片狀、環(huán)狀或龜裂狀,鱗片邊緣較粗糙,排列密度較高(約 60-100 個 /cm),鱗片高度和間距不均勻。
羊絨鱗片:鱗片更薄、更圓潤,呈環(huán)形或斜條狀,排列密度較低(約 50-70 個 /cm),鱗片邊緣平滑,間距較均勻,纖維直徑通常比羊毛細(xì)(羊絨約 14-19μm,羊毛約 19-30μm)。
四、奧林巴斯CX33生物顯微鏡細(xì)節(jié)優(yōu)化與記錄
對比度增強(qiáng)技巧
若鱗片反光強(qiáng)烈,可降低光源亮度或縮小孔徑光闌,利用斜射光突出鱗片邊緣陰影,增強(qiáng)立體感。
嘗試使用相差(Phase Contrast)附件(若 CX33 配備),可更清晰觀察透明鱗片的細(xì)微結(jié)構(gòu)。
圖像記錄
連接顯微鏡相機(jī)(如奧林巴斯 DP 系列),設(shè)置分辨率(建議≥1200×1200 像素)、白平衡(自然光模式),拍攝鱗片典型區(qū)域的照片或視頻。
記錄參數(shù):包括物鏡倍率、目鏡倍率、光源亮度、光闌設(shè)置,以便后續(xù)對比分析。
繪圖記錄:手動繪制鱗片排列示意圖,標(biāo)注鱗片形狀、密度、重疊方式等特征(適用于無成像設(shè)備時)。
五、奧林巴斯CX33生物顯微鏡注意事項
樣品保護(hù):避免樣品干燥(可在蓋玻片邊緣補(bǔ)加蒸餾水),防止鱗片因失水卷曲變形。
物鏡維護(hù):高倍鏡使用后及時用鏡頭紙蘸取無水乙醇擦拭,避免甘油或纖維殘留污染鏡頭。
纖維鑒別要點(diǎn):
羊毛與羊絨的關(guān)鍵區(qū)別在于鱗片形態(tài)和纖維直徑,需多區(qū)域觀察以排除個體差異。
若需定量分析,可使用顯微鏡配套的測微尺測量鱗片高度、間距及纖維直徑。
通過上述步驟,可清晰觀察羊毛羊絨纖維的鱗片結(jié)構(gòu),為纖維鑒別、品質(zhì)評估或科研分析提供直觀依據(jù)。